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单克隆细胞建库操作指南pdf
1.细胞铺板接种：转染前18-24h，取对数生长期细胞接种于24孔板中，实验前细胞密度
注：悬浮细胞细胞推荐用电转以获得理想的转染效率。电转后如出现死细胞，推荐在进行
1.细胞计数及铺板：将经过编辑后的细胞群用0.25%trypsin重新消化，用含血清的细胞培
注：按照每孔0.5个细胞铺96孔板。根据编辑效率可以大概评估获得双等位基因突变的
KO细胞株所需的最少单克隆细胞的数量。例如：细胞群的编辑效率为50%，则每个细胞
设挑不中目标单克隆的概率降低至1%以下，那么获得双等位基因突变的KO细胞株需要
的最少的单克隆细胞的数量为40（（1-11%）=1%，计算得到N=40）。
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