PG体育科技有限公司-PG电子官方网站

　　当前位置:首页专利查询杭州杰毅麦特医疗器械有限公司专利正文

　　本发明专利技术公开了一种细胞染色体分析快速建库方法，包括以下步骤：(1)细胞中直接加入蛋白酶K裂解细胞；(2)直接往步骤1反应体系中加入DNA破碎酶和DNA末端补平试剂，(3)直接向步骤2反应体系中加入DNA连接试剂，使目标待测DNA与DNA接头连接。本发明专利技术可供高通量测序仪检测的测序文库，可实现单管试验，无需基因组DNA提取、无需PCR扩增、无需步骤间纯化，从而使基于微量细胞的染色体测序检测更快速和更简便。本发明专利技术还公开了一种细胞染色体分析快速建库试剂盒。

　　本专利技术属于细胞染色体检测领域，具体涉及一种用于检测染色体结构变异的DNA测序文库的构建方法及试剂盒。

　　每一个人类细胞都有23对染色体，在遗传和自然过程中，有些染色体结构发生了改变，从而造成了各种出生缺陷、不明原因的流产。常见的染色体结构变异有以下几类：1.缺失：染色体中某一片段的缺失例如，猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失引起的遗传病，因为患病儿童哭声轻，音调高，很像猫叫而得名。2.重复：染色体增加了某一片段果蝇的棒眼现象就是X染色体上的部分重复引起的。3.倒位：染色体某一片段的位置颠倒了180度，造成染色体内的重新排列如女性习惯性流产(第9号染色体长臂倒置)4.易位：染色体的某一片段移接到另一条非同源染色体上或同一条染色体上的不同区域如惯性粒白血病(第14号与第22号染色体部分易位)。为了更好地理解出生缺陷的原因，反复流产的原因以及预防，经常需要对细胞的染色体进行检测分析。最常规的方法为细胞核型，核型指染色体组在有丝分裂中期的表型，包括染色体数目、大小、形态特征的总和。细胞核型分析是在有经验的遗传技术人员操作下，通过显微镜肉眼

　　一种细胞染色体分析快速建库方法，其特征在于，包括以下步骤：1)细胞中直接加入蛋白酶K，裂解细胞；2)直接往步骤1反应体系中加入DNA破碎酶和DNA末端补平试剂；3)直接往步骤2反应体系中加入DNA连接试剂，使目标待测DNA与DNA接头连接。

　　1.一种细胞染色体分析快速建库方法，其特征在于，包括以下步骤：1)细胞中直接加入蛋白酶K，裂解细胞；2)直接往步骤1反应体系中加入DNA破碎酶和DNA末端补平试剂；3)直接往步骤2反应体系中加入DNA连接试剂，使目标待测DNA与DNA接头连接。2.根据权利要求1所述的建库方法，其特征在于，步骤1中细胞的来源为全血、白细胞、胎儿有核红细胞或羊水中胎儿脱落细胞。3.根据权利要求1所述的建库方法，其特征在于，步骤1裂解细胞的反应条件是60℃20分钟，95℃5分钟灭活。4.根据权利要求1所述的建库方法，其特征在于，步骤2所述DNA破碎酶为脱氧核糖核酸酶I、脱氧核糖核酸酶II或核酸外切酶III的一种或多种；所述DNA末端补平试剂由DNA末端补平酶、dNTPs和Tris缓冲液组成，DNA末端补平酶为T4DNA聚合酶、Klenowexo-、T4DNA磷酸激酶(T4DNAPNK)、Taq聚合酶或Klenow酶中的一种或多种。5.根据权利要求4...